切削刃方法揭示了什么让Purkinje神经元独特
在瑞肯脑科学研究所和日本生命科学技术中心的合作中,科学家们联合了尖端方法,以获得在Purkinje神经元的特定部分制造的蛋白质的综合目录。
研究,由DRS领导。Riken Bsi和Charles Plessy的单位领导者Thomas Lavey,Riken Clst的单位领导者成功地确定了富含大鼠Purkinje的数千RNA神经元。该综合性清单具有更好地了解这些神经元内的分子事件的关键,以及与豚鼠细胞相关的疾病的潜在见解,如Ataxias(影响运动的疾病)和自闭症。
“浦本吉神经元仍然是最神秘的脑细胞之一,接受比任何其他神经元更多的联系,并且具有神经元中独特的结构特征,”萨蒙博士说。这些大型神经元具有独特的形状,具有广泛的分支延伸,称为枝形延伸部,其接收信号,以及用于向其他神经元发送信号的单个轴突。与其他不同抑制神经元本地行动在其邻居身上,Purkinje细胞关闭了位于小脑皮质外部的神经元。
博士。这项研究的联合作者和同事不仅蛋白质与其他神经元区分蛋白质,而且鉴定了哪些蛋白质,还鉴定了哪些蛋白质,而且还鉴定了蛋白质的蛋白质。隔离树突和检查其内容是具有挑战性的,研究人员采用复杂方法完成了该技术壮举。
虽然身体的所有细胞具有相同的DNA,但它们使不同的蛋白质产生不同的蛋白质,这取决于基因组的部分是活性的。为了使蛋白质,信使RNA(mRNA)携带从细胞核中的基因编码的信息,对核糖体蛋白质制造细胞质中的机器。通过将两种称为陷阱(转化核糖体亲和力纯化)和笼式的高通量方法组合(在Riken开发的基因表达帽分析),研究人员可以专门捕获并鉴定MRNA,因为它们在大鼠中被核糖体被翻译成蛋白质Purkinje神经元。
陷阱方法将标签引入核糖体,研究人员使用生化方法用特异性来自Purkinje细胞的结合mRNA纯化标记的核糖体,揭示了制造的蛋白质。然后允许它们快速序列并识别众多捕获的MRNA。使用微粉切除将细胞体与树状树枝状物分离,允许研究人员识别每个隔室独有的蛋白质。他们发现有许多不同种类的蛋白质,特别是与细胞体不同的树突中制造的蛋白质。
对分子景观的近乎详尽的调查允许研究人员发现Purkinje神经元和先前未知的MRNA的新型标识符。“新方法的引入使我们能够进入通常难以检测的MRNA,特别是那些处于低丰度的MRNA,而是在功能上重要的,例如膜受体,运输扣和离子渠道,”萨蒙博士说。
本研究中使用的方法应广泛适用于其他神经元类型和其他哺乳动物,包括灵长类动物,为比较研究铺平的方式,这些方法可以揭示复杂认知能力的起源或影响大脑的疾病中的因果缺陷。
进一步探索
用户评论