新的检测方法有助于简单、快速、廉价地确定淋巴瘤亚型
随着靶向淋巴瘤疗法的出现，区分弥漫性大b细胞淋巴瘤(DLBCL)的两种主要亚型变得越来越重要，DLBCL是最常见的非霍奇金淋巴瘤。这些是生发中心b细胞样(GCB)和活化b细胞样(ABC)，它们在管理和结果上有所不同。一份来自分子诊断杂志描述逆转录酶的使用?多重结扎依赖探针扩增法(RT-MLPA)用于鉴别DLBCL亚型。RT-MLPA与当前的金标准技术一样精确，并具有简单、灵活、周转时间短、成本低和效率高等优点。
“疾病进展和临床结果的差异至少在一定程度上可以用疾病的异质性来解释淋巴瘤，可分为两种不同结果的主要亚型。不幸的是，这些淋巴瘤在常规诊断中在形态上无法区分，这是发展靶向治疗的一个主要问题。此外，基于阵列的基因表达分析(GEP)，被认为是鉴别这些肿瘤的金标准，仍然不能很好地转位到常规诊断中，并且已经提出的替代免疫组化(IHC)算法通常被认为不可靠，”法国鲁昂大学生物医学研究与创新研究所Henri Becquerel中心的首席研究员Philippe Ruminy博士解释说。
研究人员评估了一种简单快速的RT-MLPA检测方法。他们分析了259例新发DLBCL患者的淋巴结活检，其中195例来自Henri Becquerel中心，64例来自外部小组(淋巴瘤研究协会)。
RT-MLPA法与鉴别两种淋巴瘤亚型的金标准法进行了比较。在随机选择的50例DLBCL病例的训练系列中，新方法将90%的病例分为预期亚型(20例GCB和25例ABC)，而10%被认为不可分类。在第二个独立验证系列中，65个样本中93%被RT-MLPA正确分类。
研究人员还表明，RT-MLPA对分析存档的福尔马林固定、石蜡包埋(FFPE)组织样本是敏感的。对冷冻活检和FFPE活检样本的比较表明，RT-MLPA法正确分类了28例病例中的89.3%。“因为RT-MLPA只需要短的cDNA片段来正确地结合和连接基因特异性的寡核苷酸探针，它受低RNA浓度和RNA降解的影响较小。因此，它可以用于档案收集的回顾性分析，并将患者纳入前瞻性临床试验，因为只有少数机构定期收集冷冻活检材料，”Ruminy博士指出。
为了评估该检测的预后价值，研究人员观察了2001年至2011年间诊断的135例治疗淋巴瘤患者的生存情况。他们发现，通过RT-MLPA检测确定为ABC亚型的患者的无进展生存期和总生存期明显低于GCB亚型的患者。他们还发现MLPA标记中的几个单独基因的表达与预后显著相关(即高LMO2、高BCL6和低TNFRSF13B表达)。
“可靠且具有成本效益的RT-MLPA检测可以在一天内得出结果，并且所需试剂的成本低于每个样品5美元。由于RT-MLPA使用的材料和设备是许多实验室的标准，该过程可以很容易地实现常规使用，”Ruminy博士说。
