新型CRISPR-CAS9筛选使得能够发现新的靶向疾病免疫疗法

由Dana-Farber /波士顿儿童癌症和血液疾病的团队开发的一种新型筛选方法 - 使用CRISPR-CAS9基因组编辑技术来测试小鼠数千种肿瘤基因的功能 - 揭示了可能潜在地提升的新药物目标PD-1检查点抑制剂的有效性，这是一个有前途的新类癌症免疫疗法。

在今天在线发布的调查结果自然，Dana-Farber /波士顿儿童的团队由儿科肿瘤学家W. Nick Haining，B.M.，B.Ch.-报道肿瘤细胞中PTPN2基因的缺失使其更容易受到PD-1检查点抑制剂的影响。PD-1阻断是一种药物，即“释放制动器”免疫细胞，使他们能够定位和摧毁癌细胞。

“PD-1检查点抑制剂转化了许多癌症的治疗，”新论文中的高级作者博士表示，他也是哈佛医学院和广大麻省理工学院和哈佛大学副教授的儿科教授。ob体育开户网址“尽管这类新阶级的临床成功癌症免疫疗法，大多数患者不会从PD-1封锁中获得临床益处。“

即，海宁所说，已经引发了额外的试验，以研究其他药物是否与PD-1抑制剂组合使用时，可以增加癌症对治疗的患者的数量。

“到目前为止，挑战一直在寻找最有效的免疫治疗目标，并在与PD-1抑制剂结合使用时优先考虑最佳，”Hainty说。“所以，我们开始开发一个更好的系统，用于识别新的药物目标，这可能会帮助身体自身的免疫系统对抗癌症的攻击。

“我们的工作表明，有一种广泛的生物途径，可以旨在使免疫疗法更加成功，”海宁持续存在。“许多人都是我们无法预测的令人惊讶的途径。例如，没有这种筛查方法，PTPN2是癌症免疫疗法的良好药物靶标也不是显而易见的。”

筛选成千上万的潜在目标

为了铸造宽阔的网，本文的首次作者Robert Manguso是海宁实验室的研究生设计，设计了一种遗传筛查系统，用于鉴定癌细胞用于逃避免疫发作的基因。他使用CRISPR-CAS9，一种基因组编辑技术，如一对分子剪​​刀，以在遗传密码中的精确位置切割DNA，系统地敲除黑色素瘤皮肤癌细胞表达的2,368个基因。然后，Manguso能够识别哪些基因，当删除时使癌细胞更容易受到PD-1阻断。

Manguso由MangeNoom皮肤癌细胞开始，使其全部包含Cas9，“切割”酶是CRISPR编辑系统的一部分。然后，使用病毒作为递送车辆，他用不同的“单指导RNA”遗传密码序列编程了每个单元。与CAS9酶组合，SGRNA代码 - 约20个氨基酸在长度的2,368个不同基因中被消除。

通过将肿瘤细胞注入小鼠并用PD-1检查点抑制剂将它们施用，曼加苏能够将修饰的肿瘤细胞存活地归结。因其缺失的基因而受到影响的人被敏感到PD-1封锁。

使用这种方法，Manguso和Haining首先证实了已知的两个基因的作用是免疫的“避难者”-PD-L1和CD47，已经在临床试验中的药物抑制剂。然后，他们发现了各种新免疫逃避者，如果抑制治疗，可以增强PD-1癌症免疫疗法。一个特殊兴趣的新发现基因是PTPN2。

“PTPN2通常将制动器放在否则窒息的免疫信号通路上癌症细胞“海宁说。”删除ptpn2斜坡这些免疫信号通路，制作肿瘤细胞在免疫发作下，成长较慢，更容易死亡。“

获得更多地面

随着新的筛选方法，海宁的团队正在迅速扩大他们的努力，以寻找额外的新药靶标可以提高免疫疗法。

海宁表示，该团队正在扩大他们从筛选成千上万的方法基因一次最终能够筛查全基因组，并将黑素瘤超越结肠，肺，肾癌等等。他组建了一群跨越Dana-Fasber /波士顿儿童和广泛研究所的大型科学家团队，以解决伴随在这种大规模的筛选工作的技术挑战。

与此同时，虽然更多的新潜力药物目标很可能在拐角处，海宁的团队正在基于关于PTPN2的调查结果采取行动。

“我们正在思考PTPN2抑制剂看起来像什么，”海宁说。“很容易想象制作一个小分子药品关闭ptpn2。“

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