实时研究神经网络活动的新机会
在过去的十年里,神经生物学关注的是神经网络的功能,而不是单个神经细胞。大脑的关键功能,包括信息的处理、存储和传输,都是在这个层次上完成的。然而,在神经网络的研究中,研究者们面临着一些方法上的困难。传统的方法,比如那些旨在研究单个神经元的电和代谢活动的方法,并不能提供任何关于网络结构或功能特征的见解。常用的方法如酶联免疫吸附试验(ELISA)、聚合酶链反应(PCR),或古典生化方法并不适用于神经网络的研究,因为他们不允许活细胞实验(生物样品必须是固定的),导致的破坏细胞之间的债券。
下诺夫哥罗德国家研究中心洛巴切夫斯基州立大学的科学家们现在已经成功地使用和优化了一个方法确定生活中mRNA表达的水平,积极运作细胞。该方法基于德国Merck开发的金RNA探针的使用。
由于其小的体积和特殊的性质,RNA探针很容易穿透细胞,并能在特异性结合目标mRNA后发出荧光。mRNA的可视化是通过显微镜进行的,不需要对实验样品的制备进行额外的操作。
从mRNA表达的水平来看,研究人员可以判断细胞中蛋白质合成的活性,无论是正常状态还是在各种应力因子的影响下。根据UNN生物医学研究所主任Maria Vedunova的说法,使用RNA探针与钙成像组合使用,一种确定的方法代谢活动的神经网络,使得研究人员能够研究网络中合成研究人员感兴趣的mRNA单位的细胞的活性。
“这种方法允许Nizhny Novgorod科学家在开发缺氧期间保护脑细胞的新方法方面取得进展。该方法是基于脑衍生的使用神经营养因子(BDNF)和神经胶质性神经营养因子(GDNF)。这些信号分子在人体中合成并调节神经细胞的分化,神经细胞的生长以及之间的形成细胞(突触),“Maria Vedunova解释道。
本研究已显示,在缺氧,BDNF和GDNF期间抑制神经细胞死亡并保持神经元活力。揭示了神经营养因子中神经营养因子作用的分子机制的一些特征,以及一种神经营养因子对另一个神经营养因子的影响。
因此,已证明RNA探针提供了神经生物学研究的信息方法,并开辟了研究正常条件下脑功能机制的新前景,并在压力因子的不利影响下。
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