图1 EZH2通过物理相互作用增加FOXA1蛋白的稳定性。(A和B)用对照(shCtrl)或两种独立的shEZH2慢病毒(shEZH2- c和shEZH2-3′)感染PCa细胞72小时后进行WB。(C)用指示的EZH2慢病毒感染LNCaP细胞96小时,用WB分析。(D)蛋白质合成抑制剂CHX (150 μg/ml)处理LNCaP细胞0、2、4、6小时后采集细胞进行WB。(E和F)用指定的质粒转染293T细胞48小时。使用血凝素(HA) (E)或标记抗体(F)进行共免疫沉淀(co-IP),然后是WB。(G)在LNCaP核裂解液中加入FOXA1、EZH2或免疫球蛋白G (IgG)抗体的Co-IP,然后是WB。(H)用纯化的重组GST-绿色荧光蛋白(GFP)或GST- ezh2偶联到GST珠上,下拉纯化的MBP- foxa1,用MBP抗体进行WB分析。(I)对LNCaP细胞核提取物进行分离,进行WB处理。(J)使用LNCaP核裂解液进行Co-IP,使用FOXA1、SUZ12或IgG抗体。 (K and L) EZH2 was cotransfected into 293T cells along with various FLAG-tagged FOXA1 domain constructs (K). Co-IP assay was performed with anti-FLAG M2 beads followed by WB using anti-EZH2 (L). EZH2-binding domains are highlighted in yellow. Credit:科学的进步(2021)。DOI:10.1126 / sciadv.abe2261
用户评论