VAIA方法的优化。A)将布满靶抗原的硝化纤维膜同心放置在VFD反应器中,反应器内装有石英管(外径20 mm,内径17.5 mm,长18.5 cm)。在整个检测步骤中,VFD反应器管倾斜45°并以1500 rpm旋转。如所示,在此速度下,剪切应力由旋转的顶部拓扑流体流动所支配。从VFD反应器中取出膜,通过添加比色试剂来观察分析点。B)间接噬菌体IA用于优化VAIA转速和分析时间。系统筛选这些参数的9种组合发现1500 rpm和4.5分钟的分析时间(基础时间)产生了最高的信噪比和最低的误差。误差条表示SEM (n=3)。C)使用直接eGFP-FLAG检测IA来比较VAIA与传统IA方法的定量。VAIA比传统方法更快、更健壮、更灵敏,而且成本更低。 The fluid flow was examined by performing VAIA with either hemispherical-bottom VFD reactors or flat-bottom VFD reactors. Error bars represent SEM for each group of dots on each immunoblot (n=3). Percent coefficients of variation are based upon independent replicates (n=3). Credit:Angewandte Chemie国际版(2022)。DOI: 10.1002 / anie.202202021