在实验室用新的生物力学测试方法表征软组织

在实验室用新的生物力学测试方法表征软组织
生物组织磁驱动光学拉伸测试集成装置的设计。(A)用于实现毫米级软生物组织高保真机械表征的装置的工作原理示意图。(B)设置的3D模型,显示(顶部)电磁铁、CCD传感器、照明系统和显微镜兼容底座;(下)安装室、浮力单元、软组织样品、3D打印盖和样品架。(C)在奥林巴斯CKX41倒置显微镜台上运行的拉力测试仪器的照片。信贷:科学的进步(2023)。DOI: 10.1126 / sciadv.ade2522

软组织是影响人体生理和疾病的重要组成部分,因为它们在组织发育、维护和修复过程中影响细胞行为。大多数现有的方法受到综合表征技术的限制,从而损害组织结构的基本过程。

在一份新报告中科学的进步卢卡·罗莎莉亚(Luca Rosalia)和一个研究团队哈佛大学和剑桥大学物理学和工程学专业的教授,基于电磁致动器和光学应变传感器之间的闭环相互作用,开发了一种在实验室中对软组织进行单轴拉伸测试的仪器。

该团队通过使用合成弹性体来验证仪器,然后使用该设备来检查软组织的机械性能,如小鼠食管组织以及它的构成层,包括上皮组织、结缔组织和肌肉组织。科学家们提高了仪器的可靠性,为广泛研究软组织生物力学提供了一个理想的平台。

了解软组织的性质

的属性包括刚度,强度和粘弹性,这是关键不同的生物过程,包括胚胎形态发生产后发展而且生理功能.这些生物特性也在启动和发展各种病理,从癌症到伤口愈合和纤维化,以及心血管疾病中发挥作用。然而,由于现有表征方法的限制,生物组织的可用力学数据是稀疏的。例如,目前,生物组织的拉伸性能主要可以用原子力显微镜

在这项工作中,Rosalia和团队介绍了拉伸测试装置的设计和开发,并通过首先使用已知力学性能的合成弹性体,然后对小鼠食管及其本构层进行生物力学表征,以了解新开发装置的性能,并确定实验室中建立的方法的可靠性,验证了其与常规测试方法的性能。

在实验室用新的生物力学测试方法表征软组织
使用合成材料样品对照标准方法进行器件验证。(A)左:设备运行照片(空气配置),使用机械夹具安装弹性试样。右图:5544 Instron测试器的照片,使用类似的夹持器安装弹性样品。(B) Elite Double 8和22样品在我们的设备(空气配置)和Instron测试仪上的应力-应变曲线。(C) Elite Double 8和22样品在我们的设备(PBS安装室配置)和Instron机器上的应力-应变曲线;每次测试N = 3个样本。误差条代表1sd。信贷:科学的进步(2023)。DOI: 10.1126 / sciadv.ade2522

设备的设计考虑

研究人员使用该仪器在毫米尺度上测试其生物力学特性。这些参数对应于临床常规活检的人体组织样本的平均大小,以及生物医学中使用的小鼠胚胎和成人组织。该团队将拟议仪器的结构根据其应用分为三个部分,包括样品处理、力的应用和变形的测量。

研究人员设计了机械仪器,使其光源、电磁铁和安装样品室保持可靠的配置。他们集成了设备的电气和光学元件,同时进行拉伸测试和小生物组织标本的实时成像。他们还在设备内安装了一个磁性驱动器,一个产生可变磁场的电磁铁和一个光学系统。

在实验室用新的生物力学测试方法表征软组织
小鼠食道的预处理、应变率和迟滞研究。(A)在拟议装置上单轴拉伸下的食管壁标本的侧视图。(B)六个加载周期内预适应分析食道的代表性应力-应变行为。(C)后续每个预处理加载循环(n = 3个样品)的绝对应变偏差。(D) ε˙= 0.025、0.050和0.100 s−1时应变率分析的规定参考信号和测量位置信号。(E)不同应变速率下的应力-应变响应。(F)应变率分析(n = 3个样品)在0 ~ 10%和50 ~ 60%拉伸时的杨氏模量。(G)用于迟滞分析的规定参考信号和测量位置信号。(H)食道样品在加载和卸载循环中的应力-应变行为,用于滞后分析。(I) n = 1样品重复三次,滞回周期中0 ~ 10%和50 ~ 60%拉伸时的杨氏模量。 In all graphs, error bars represent 1 SD. Credit:科学的进步(2023)。DOI: 10.1126 / sciadv.ade2522

在实验室里重建一个微生理环境

该团队试图通过尽可能地保持软组织与生理环境的密切联系来测试它们的生物力学。他们通过设计一个透明的安装室并将测试样本组织浸入盐水溶液中来实现这一点。然后,他们设计了一个闭环反馈系统,以促进电磁稳定性和从样品中产生的,其中包括外部传感器、振动或传感器噪声。

科学家们通过在仪器上和Instron拉伸测试仪上使用聚乙烯醇硅氧烷,用既定的方法评估其性能,对该设备进行了比较验证。接下来,他们测试了安装室,以重建生物组织的生理环境有限元建模进一步表征该装置的应力-应变响应。

食道的生物力学特征

接下来,研究小组确定了食管周围的多个组织层,包括粘膜、粘膜下层和肌肉层。使用该设备,他们还进行了首次研究中的单轴拉伸测试技术,以生物力学表征整个食管组织及其三个主要组成层。粘膜为鳞状分层上皮,有分化的上基细胞和自我更新的基底祖细胞。

由于在很大程度上局限于动物模型的研究领域中缺乏足够的测试方法,生物工程师们还没有全面地描述食管的力学行为。在这项工作中,该团队进行了第一个单轴拉伸测试方法,以生物力学表征整个小鼠食管组织及其三个组成层。

在实验室用新的生物力学测试方法表征软组织
食管为多层组织的力学特征。(A)苏木精和伊红(H&E)染色的食管切片,显示上皮层(粘膜层)、基质层(粘膜下层)和肌肉层(肌膜层)。比例尺,200 μm。(B)完整食管、未分化上皮和间质、肌肉层的应力-应变行为(两层模型)。(C)完整食管和每一层的应力-应变行为(三层模型)。(D)完整食管壁和分离组织层0 ~ 10%伸长时的杨氏模量。(E)完整食管和分离组织层拉伸50 ~ 60%时的杨氏模量。(F)生理应变下完整食管和分离组织层的杨氏模量。每次试验采用3个不同的试样(n = 3),每次试验重复5次。在所有图表中,误差条代表1sd。 Credit:科学的进步(2023)。DOI: 10.1126 / sciadv.ade2522

前景

通过这种方法,Luca Rosalia及其同事开发了一种用于软生物组织单轴拉伸测试的高保真设备。该装置作为一个闭环系统,根据电磁铁和铁磁珠之间的相互作用产生拉力,同时跟踪样品在各种加载条件下的位移。科学家们通过表征合成材料的弹性特性来验证该设备,随后研究了小鼠食管的生物力学。

未来的研究可以促进进一步测量软组织的粘弹性特性,最终支持临床研究中转化机械生物学诊断或预后结果的知情决策过程。

更多信息:Luca Rosalia等人,一种磁驱动的光学感应拉伸测试方法,用于软生物组织的力学特性,科学的进步(2023)。DOI: 10.1126 / sciadv.ade2522

吴培勋等,细胞力学性能评估方法的比较,自然方法(2018)。DOI: 10.1038 / s41592 - 018 - 0015 - 1

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引用:在实验室中用新的生物力学测试方法描述软组织(2023,1月23日)检索于2023年1月25日从//www.puressens.com/news/2023-01-characterizing-soft-biological-tissue-biomechanical.html
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